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水稻gus染色,水稻染色体组有几种类型

水稻gus染色,水稻染色体组有几种类型

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  1. GUS染色方法
  2. gus染色为啥要洗脱
  3. 【氨基酸】水稻氨基酸吸收与转运
  4. gus染色步骤
  5. gus染色原理

1、GUS染色方法

取上一步配制好的GUS染液,将你的样品加入其中,然后用锡箔纸包起来,放置于37℃,12h-16h左右,就可以看到靛蓝色。染色具体时间依据实验设计而定,可灵活变动。

根据gus基因检测所用的底物不同,可以选择三种检测方法:组织化学法、分光光度法和荧光法(灵感度为分光光度检测法最高)。其中最为常用的是组织化学法。

用配好的GUS染色缓冲液冲洗三遍,然后加入含有X-gual的染色液进行染色,可以用5ml的离心管染色,加的染色液把材料覆盖住就好了,多加几个样品也没事。

一般分析方法为:Image-Adjust-Threshold,调节Hue(色度)、Saturation(饱和度)与Brightness(亮度)选中胶原计算其面积。该方法需要手动调节HSB阈值,效率低下。

采用某种β-葡萄糖苷酶作底物,其反应产物可用分光光度,荧光和组织化学的方法检测。其中组织化学法是催化的底物是X-gluc,产物为蓝色化合物,该方法可观察到外源基因在特定器官,组织,甚至单个细胞内的表达情况。

2、gus染色为啥要洗脱

Gus 基因存在于某些细菌体内,编码β-葡萄糖苷酸酶(β-glucuronidase,GUS),该酶是一种水解酶,能催化许多β-葡萄糖苷酯类物质的水解。

脱色:将染色好的材料转入70%酒精中脱色2-3次,直至阴性对照材料变为白色。GUS染色阳性的蓝色斑点非常稳定,不会被酒精脱色。

这是由其初始产物经氧化二聚作用形成的靛蓝染料,它使具Gus活性的部位或位点呈现蓝色,用肉眼或在显微镜下可看到,且在一定程度下根据染色深浅可反映出Gus活性。

β- D - 葡糖醛酸酶(GUS基因编码)是从大肠杆菌K- 12 菌株分离出的一种酸性水解酶,能催化许多β-葡萄糖苷酯类物质的水解。

3、【氨基酸】水稻氨基酸吸收与转运

这个研究发现水稻根系能够从土壤中吸收天冬氨酸,而且粳稻的吸收效率是籼稻的 5 倍。遗传连锁分析鉴定到了 OsLTH1 和天冬氨酸的吸收相关。

水稻幼苗能直接吸收氨基酸和酰胺。水稻幼苗可以直接吸收甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸、组氨酸等氨基酸和天门冬酰胺,还能吸收核酸和各种核苷酸,水稻根系能够从土壤中吸收天冬氨酸,大麦和小麦能吸收各种磷酸己糖和磷酸甘油。

存在。当多种氨基酸竞争同一种载体时,载体上的转运速率会因不同蛋白组成、数量和亲和力的不同而不同,从而影响氨基酸的吸收和转运速率。人体的氨基酸转运系统可以同时转运多种不同的氨基酸,这些氨基酸之间通常会存在竞争关系。

氨基酸通过小肠上皮细胞膜为主动运输.。氨基酸在小肠内被吸收,沿着肝 门静脉进入肝脏。 一部分氨基酸在肝脏内进行分解或合成蛋白质;另一部分氨基 酸继续随血液分布到各个组织器官,任其选用,合成各种特异性的组织蛋白质。

氨基酸、葡萄糖和各种离子出入细胞时,若从高浓度的一侧到低浓度的一侧,只需载体,不消耗能量,都称之为协助扩散;若这些物质从低浓度的一侧到高浓度的一侧,这时既需要载体又需要消耗能量,称之为主动运输。

4、gus染色步骤

GUS染色步骤 1)取材:将根茎、叶片、花瓣等组织剪成小片,放到5ml离心管;【注意】:染色用植物材料的制备方法根据特定组织和器官类型而有差异。

取上一步配制好的GUS染液,将你的样品加入其中,然后用锡箔纸包起来,放置于37℃,12h-16h左右,就可以看到靛蓝色。染色具体时间依据实验设计而定,可灵活变动。

高效分析步骤如下:ImageJ软件File-Open打开待分析GUS染色图片;Image-Color-ColourDeconvolution,选择GUSTrichrome,点击OK即可得到分离结果。

用配好的GUS染色缓冲液冲洗三遍,然后加入含有X-gual的染色液进行染色,可以用5ml的离心管染色,加的染色液把材料覆盖住就好了,多加几个样品也没事。

5、gus染色原理

这是由其初始产物经氧化二聚作用形成的靛蓝染料,它使具Gus活性的部位或位点呈现蓝色,用肉眼或在显微镜下可看到,且在一定程度下根据染色深浅可反映出Gus活性。

Gus 基因存在于某些细菌体内,编码β-葡萄糖苷酸酶(β-glucuronidase,GUS),该酶是一种水解酶,能催化许多β-葡萄糖苷酯类物质的水解。

β- D - 葡糖醛酸酶(GUS基因编码)是从大肠杆菌K- 12 菌株分离出的一种酸性水解酶,能催化许多β-葡萄糖苷酯类物质的水解。

这是由其初始产物的氧化供体形成的靛蓝染料,在GUS活性部分或部位呈蓝色,肉眼或显微镜下可见,根据染色GUS活性可在一定程度上反映出来。

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