水稻DNA提取机-水稻dna提取实验报告
大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于水稻DNA提取机的问题,于是小编就整理了4个相关介绍水稻DNA提取机的解答,让我们一起看看吧。
1、水稻基因组DNA提取条带不均一,总出现拖尾,什么情况,求大虾分析下?_百 ...
可以考虑是不是样品不纯,目的产物与杂带相差不大,所以要多跑一段时间才有尾巴。参考marker,marker应该不会有。如果有的话说明配胶有问题。
加样量过大。过多的量会造成加样孔超载,从而导致拖尾和弥散,对于较大的DNA此现象更明显。9制胶过程中胶孔没 制好。10 EB没有冲洗干净。11模板混有基因组DNA,或模板中混有蛋白。12非特异反映。
提质粒的时候经常有这种个现象,有可能是样品浓度过高了。这种情况简单,稀释一下就行了。 提基因组DNA的时候也常出现拖尾,最可能的就是提的DNA中掺杂有蛋白质,蛋白质会拽DNA的泳动。
在提取效果比较好的情况下)。但是,因为不可能将RNA完全去除,和在提取时不可避免的将DNA打断为更小,所以肯定存在一条较长的拖尾,有些RNA去除不好的还会在比较小的位置存在一条带,那是没有除尽的RNA。
由于提取过程中闭合环状DNA遭到破坏,环状结构打开变为直链DNA)。其余条带可能是质粒遭到破坏发生断裂、降解形成拖尾条带,或基因组DNA未能完全沉降,出现杂带。解决办法应该从溶液配制以及实验操作上寻找原因。
2、提取水稻DNA
采用TPS法提取水稻基因组DNA,可以按照以下步骤操作: 取2cm长的水稻叶片放入5ml的EP管中,加入500-750ul的TPS提取液(100mM Tris-HCl pH0,10mM EDTA pH0,1M KCl),加入直径为5mm的钢珠。
注意以下几点:1:植物材料应尽量幼嫩,加液N研磨时尽量充分;液氮要足够多,研的速度要快。
进行转录组测序:从水稻植株中提取RNA,然后利用反转录酶合成cDNA,再进行高通量测序,获得水稻的转录组数据,最终得到水稻的cDNA序列。
以前做过提取植物的DNA 不过我们不是用电钻磨的,我们是把叶子剪碎后放入陶瓷研钵,再加液氮磨的。由于液氮挥发很快,需要多次加液氮,直到磨细为止。当然,这样的话需要比较多的样品。
3、如何从植物组织中提取基因组dna
一)水稻幼苗或其它禾木科植物基因组DNA提取 在50ml离心管中加入20ml提取缓冲液?, 60?水浴预热。
原理上是可以的,但是我们是不会用植物的根提取DNA的。
. 称取2~5g 新鲜菠菜幼嫩组织或小麦黄花苗等植物材料,用自来水、蒸馏水先后冲洗叶面,用滤纸吸干水分备用。叶片称重后剪成1cm 长,置研钵中,经液氮冷冻后研磨成粉末。
.提取DNA (1)提取DNA所用的提取液、吸头、离心管等需要在高压灭菌锅中121℃(约1 kg/cm2)高压灭菌20 min。
材料选择:应选择无菌、新鲜的植物组织,以降低提取过程中污染的可能性并减少降解。
4、水稻基因组DNA快速提取方法(TPS法)
一)水稻幼苗或其它禾木科植物基因组DNA提取 在50ml离心管中加入20ml提取缓冲液?, 60?水浴预热。
.提取细胞核物质:顺时针方向搅拌,稍快,稍重。5 min 2.溶解DNA:3.析出含DNA的黏稠物:蒸馏水300mL,逆时针方向搅拌,缓慢 4.过滤:取黏稠物 5.再溶解:顺时针方向搅拌,较慢。3 min 6.过滤:取滤液。
DNA提取主要是CTAB方法,其他的方法还有物理方式如玻璃珠法、超声波法、研磨法、冻融法。化学方式如异硫氰酸胍法、碱裂解法。生物方式:酶法。根据核酸分离纯化方式的不同有硅质材料、阴离子交换树脂等。
植物组织提取基因组dna 材料 幼嫩叶子。设备 移液器,冷冻高速离心机,台式高速离心机,水浴锅,陶瓷研钵,50ml离心管(有盖)及5ml和5ml离心管,弯成钩状的小玻棒。
基因组DNA提取方法 制备基因组DNA是进行基因结构和功能研究的重要步骤,通常要求得到的片段的长度不小于100-200kb。在DNA提取过程中应尽量避免使DNA断裂和降解的各种因素,以保证DNA的完整性,为后续的实验打下基础。
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